微柱液相色譜儀技術經(jīng)歷了數(shù)十年的發(fā)展，從早期的使用不銹鋼管的微孔填充柱，發(fā)展到使用熔融硅膠毛細管的毛細管填充柱。進入20世紀80年代后期，隨著生命科學研究、臨床醫(yī)學研究、新型藥物研制、生物工程技術的發(fā)展、對產(chǎn)品質(zhì)量控制和環(huán)境監(jiān)測指標的升級，提供了大量組成復雜樣品的分析任務。

為此必須提供具有分離能力和高靈敏度檢測能力的全新分析方法，并用于微量和痕量組分的分離和檢測。

納米（標度）液相色譜技術和超高壓液相色譜技術正是適應上述分析要求，先后于20世紀80年代末期和90年代初期先后提出。他們突破了常規(guī)液相色譜儀理論的約束，采用粒徑約為1.0μm的粒子填充色譜柱。在實驗裝置上采用當代的技術，用微流路處理器提供納升數(shù)量級微小、穩(wěn)定的流動相流量，用微芯片制作技術在硅晶片上蝕刻出納米尺寸的色譜柱管，制造了填充壓力高達410MPa（60000psi）的高壓輸液泵和耐壓1030MPa（150000psi）的高壓進樣閥，實現(xiàn)了前人從未實踐過的毛細管液相色譜分離技術。創(chuàng)建了理論塔板數(shù)高至20~40萬塊/m的高柱效，完成了組成復雜生物樣品的分離，還實現(xiàn)了與MS的聯(lián)用。從這些新技術的進展，可充分看到色譜工作者的創(chuàng)造能力。

用于微柱液相色譜儀分析的高壓輸液泵，其輸出流量應當準確，并有良好的重復性。由于輸出流量較小，早期曾使用氣動放大泵和螺桿注射泵，后經(jīng)改造常規(guī)往復式柱塞泵，使其也可輸出低流量流動相。

現(xiàn)多采用小型螺桿注射泵和往復式柱塞泵。往復式柱塞泵由于螺桿注射泵，它具有對大的柱反壓的補償能力，快的流路平衡和穩(wěn)定性，并可用于梯度洗脫。由于液流的混合有一定的困難，在低流速下柱加壓是一個耗費時間的過程，若在梯度洗脫中使用螺桿注射泵，會明顯的增加梯度延遲。

當對微柱進行二元、三元、四元梯度洗脫時，使用低壓梯度仍是的方法，此時應使用精密時間比例電磁閥。此閥能準確控制每種溶劑的比例，確保不存在滲漏和粘結，使每種低流量溶劑在小體積混合器中*混合。當使用高壓梯度洗脫時也必須使用小體積的混合器，為保證高的混合效率，混合器也可使用一個很小的填充柱。對內(nèi)徑1.0mm、長200~300mm的微柱，其柱體積約為100~150μL；對內(nèi)徑0.5mm、長250mm的微柱，其柱體積已小至30μL。我們由此可知，微柱液相色譜儀梯度洗脫中所用混合器的體積要遠小于柱體積，并要具有很高的混合效率，這在儀器制作商的難度很大。當然，由于液相色譜儀廠家的技術和各方面服務是不盡相同的，要想儀器、使用壽命達到zui長，那么選擇一家比較專業(yè)的廠家是異常重要的。如果您有興趣，魯創(chuàng)分析儀器歡迎各界有志之士前來參觀指導!